Colección de microorganismos asociados a plantas de Cacao

Study Extent

Las colectas reportadas en el estudio fueron tomadas en el municipio de Cubarral en el departamento del Meta, Marsella en el departamento de Risaralda, Belalcazar en el departamento de Caldas, Vegachi en el departamento de Antioquia y San Vicente de Chucuri en el departamento de Santander.

Sampling

Para la colecta de muestras se usaron herramientas limpias y desinfectadas con hipoclorito o formol al 10%, también los técnicos de campo limpiaron sus manos. Se priorizaron fincas con posibles síntomas de la enfermedad en las regiones correspondientes, se identificaron plantas de cacao que manifiesten amarillamiento de las hojas, clorosis, marchitamiento, defoliación progresiva y paloteo, para tomar la muestra de raíz, se repica el suelo y recolectan las raíces con signos como llaga estrellada o podredumbre. Las muestras colectadas deben ser lo más representativa en cantidad (5 raíces por muestra). La humedad de la superficie de las raíces debe secarse. Envolver cada raíz por individual en papel limpio para evitar que las raíces se deterioren o formen hongos. Enviar al laboratorio de sanidad vegetal de FEDECACAO con la identificación completa de la ubicación donde se tomó la muestra. Los cultivos de hongos seran depositados en una colección que aun esta por definir.

Method steps

1. Lavar las raíces con abundante agua, solución desinfectante y con el cepillo retirar la presencia de cualquier contaminante, a partir de las raíces enfermas, retirar la corteza y cortar segmentos de 0.5 cm de tejido enfermo con (micelio blanco en forma de estrella).
2. Coloque los segmentos en un vaso precipitado, adicione etanol al 70% hasta cubrir por 1 minuto, luego en hipoclorito al 2% durante 1 minuto, pasado los dos minutos, lavar tres veces con agua destilada, secar con servilletas estéril y proceder a sembrar. En cámara de flujo laminar realizar su aislamiento.
3. Con anticipación preparar los medios de cultivo y servir en las cajas de Petri. Tomar con la piza el tejido y colocarlo en las placas de Extracto de malta agar, incubar entre 25ºC a 27ºC en condiciones de oscuridad permanente.
4. Cumplidos los 15 días de crecimiento del hongo realizar pases a otras cajas con medio, Posterior al aislamiento se procede a la identificación morfológica teniendo presente caracteristicas referenciadas.
5. En cuanto al mantenimiento y conservación de las mismas, se realiza una siembra cada tres meses que permite mantener su viabilidad como método de conservación a corto plazo, la cual consiste en transferir el cultivo del medio deshidratado a medio fresco, proporcionándole las condiciones óptimas de crecimiento.

Todos los registros son hongos pertenecientes al género Rosellinia.

1. Rosellinia
   rank: genus

Departamentos de Antioquia, Meta, Santander y Risaralda.