Colección de diatomeas del Herbario "Jaime Andrés Rodríguez". LEB-Diatomea

Study Extent

En el herbario se encuentra depositado material tipo de especies de diatomeas recogidas en diversos países: España, Bolivia, Camboya, Grecia.

Sampling

Los procedimientos de muestreo se adaptan a las peculiaridades de cada ambiente, procurando seguir en cada caso rutinas estandarizadas que garanticen la reproducibilidad de los resultados. En el caso de sistemas lóticos, la metodología seguida está basada en los protocolos estandarizados para España (AENOR 2004, 2005, Confederación Hidrográfica del Ebro 2005), basados a su vez en los protocolos europeos normalizados de muestreo y análisis de diatomeas fitobentónicas para la determinación de la calidad del agua (Kelly et al. 1998, European Committee for Standarization 2003, 2004), y ha comprendido las siguientes fases: para la recogida de muestras de diatomeas, en cada punto de muestreo se realizaron entre 3 y 10 raspados (superficie 10 a 40 cm2) en bloques de piedra de más de 64 mm de diámetro. Con el fin de obtener un muestreo representativo, se escogieron piedras en zonas preferentemente soleadas, a una profundidad aproximada de 40 cm en el centro del cauce. Se ignoraron aquellas piedras con líquenes, musgo o barro que impiden la fijación de las algas y aquellas situadas en zonas marginales que podrían quedar fuera del agua en los momentos de más bajo caudal. Las piedras se rasparon con un cepillo de dientes por la superficie expuesta, evitando la zona de contacto con el lecho del río. Los raspados se conservaron en tubos Falcon de 25 ml de capacidad que se llenaron hasta un tercio y se fijaron con formaldehido 4%. Para ambientes lacustres, el método se basa en el muestreo sobre matas de helófitos monoespecíficas, lejos de la orilla y en zonas iluminadas evitando zonas demasiado someras y con sedimento resuspendido. Para recoger muestras de tallos se utilizan muestreadores Kornijów (Kornijów & Kairesalo, 1994) con el fin de minimizar la agitación y la presencia de fitoplancton. El número de tallos a muestrear depende del diámetro de éstos. Si los tallos son finos como en Eleocharis o Juncus se recogen 10 tallos por punto de muestreo, si son muy gruesos como Typha se recoge uno y en casos intermedios como Scirpus o Phragmites se recogen 3 tallos. Las muestras se conservan con formaldehido al 4% v/v. Para separar el epifiton de los tallos se siguió el método de Zimba & Hopson (1997) que asegura la recuperación del 90% del epifiton y consiste en llenar parcialmente los botes con agua y agitar enérgicamente durante 2 minutos.

Method steps

1. Las muestras son preservadas en el campo hasta su procesado en el laboratorio. Este consiste en la eliminación de la materia orgánica mediante la adición de peróxido de hidrógeno (120 vols.) a 90 °C durante 12 h. Tras varias decantaciones por centrifugación se obtiene una suspensión limpia de frústulos de diatomeas, con la que se montan las preparaciones microscópicas mediante una resina sintética de alto índice de difracción. Estas preparaciones fueron analizadas a 1000 aumentos mediante un fotomicroscopio (MO) de campo claro dotado de Olympus BX60, equipado con u contraste interferencial y una cámara fotográfica OPTIKA acoplada, siguiendo los protocolos normalizados para el recuento e identificación de diatomeas (AENOR 2005). Unos 100-400 individuos son cuantificados e identificados al menor nivel taxonómico posible en la muestra, siguiendo la literatura taxonómica habitual (Hofmann et al. 2011 y sus referencias). Para el estudio de microscopía electrónica de barrido (MEB), las muestras son elaboradas colocando una gota de la suspensión tratada sobre una estructura metálica y dejando secar a temperatura ambiente, posteriormente recubiertas con una capa de oro de 10 nm de grosor a través de un Sistema de Metalización Modular de Alto Vacio (QUORUM Q150T ES). El estudio se realiza usando un microscopio MERLIN (Carl Zeiss), operando a 20 kV.

1. Bacillariophyta
   rank: phylum

La colección se compone de 14 muestras de España, 5 de Camboya, 5 de Bolivia y 1 de Grecia.